国外对蜂蜜的化学组成研究报道较多,如总酚和总黄酮含量的测定,以及其抗氧化性的测定,而国内相对来说较少。
本文选择了中国所产的7种较为常见的蜜源蜂蜜为实验材料,对其色度、总酚、总黄酮含量和抗氧化活性进行了测定,并分析了各指标之间的相关性,旨在为中国蜂蜜的品质评价和消费者选购蜂蜜提供一些参考意见。
1、材料与方法
1.1样品采集
市场上蜂蜜品种繁多,多以蜜源分类和定价。已有研究表明,蜂蜜颜色与其总酚含量和抗氧化能力有一定关系[5、6]。据此,经过市场调查后,选取了7种市场占用率较高、且从外观上观察具有颜色梯度的蜂蜜为实验材料。具体种类如下(按照颜色由浅至深排列):洋槐蜜、紫云英蜜、党参蜜、土黄连蜜、龙眼蜜、枣花蜜,均由江西汪氏蜜蜂园有限公司提供;野桂花蜜由遂川大洲天然食品开发基地提供。7种蜂蜜表观特征见表1。
1.2化学试剂
DPPH·tSigma-aldrich公司;肉桂酸、槲皮素、柚皮素、染料木紊、山奈酚、芹菜素、p-香豆酸、阿魏酸为中药固体制剂制造技术国家工程研究中心产品;没食子酸、儿茶素、表儿茶素、咖啡素、木犀草素、异鼠李素为中国药品生物制品检定所产品;杨梅酮、菲瑟酮、生松素为Sigma-aldrich公司产品;桑黄素、黄芩素、α-儿茶素为君创生物科技有限公司产品;3,4-二甲氧基肉桂酸、白杨素为上海精纯试剂有限公司产品;芦丁为中国医药(集团)上海化学试剂公司产品;甲醇为色谱纯;其余试剂均为国产分析纯。
1.3实验器材
JAl003N电子天平:精密科学仪器有限公司,上海;CZX-DH-50-55-s电热恒温干燥箱:跃进医疗器械厂,上海;HH-6数显恒温水浴锅:国华电器有限公司,江苏;7200可见分光光度计:尤尼柯仪器有限公司,上海;SHB—IIIA型循环水式多用真空泵:河南太康教材仪器厂;KQ3200DE型数控超声波清洗器:昆山市超声仪器公司,江苏。
美国Agilent1200型高效液相色谱仪,包括在线脱气装置,四元泵,柱温箱,光电二级管阵列检测器(DAD),手动进样装置,及G2170BALC化学工作站;50μL微量进样器。
1.4蜂蜜色度的测定
将蜂蜜用蒸馏水溶解,配制成体积比50%的工作液,在450nm下测定其吸光值。色度值以吸光度值计[8]。
1.5蜂蜜中总酚含量的测定
准确吸取1mL稀释后的蜂蜜水溶液(200mg/
mL),加入1mL的Folin-Ciocalteu试剂,混匀,然后加入5mL 1mol/mL的Na2CO3溶液,用蒸馏水将混合液定容至10mL,混合均匀,在室温、避光条件下放置1h,于760nm处测定其吸光度值。试验数据平行测定3次,结果用X±SD表示。将对照品没食子酸配置成0.1mg/mL的标准溶液,按照上述方法制定标准曲线,根据标准曲线计算出样品中的总酚含量,蜂蜜总酚含量以没食子酸的相对量(mgGAC/g honey)表示[7]。