茶花粉

茶花粉超氧化物歧化酶的性质研究

中华蜂蜜网 2016年04月27日 11时45分40秒

茶花粉具有清热、解毒、抗衰老、脱脂减肥、 治疗糖尿病、高血压等功效。茶花粉中氨基酸含量为花粉之首,微量元素锰、钴、铭等以及烟酸含量均比普通花粉高,故为保健、医疗及癌症的首选

2 结果与讨论
2.1 酶分子量及亚基分子量
茶花粉 SOD 经 SDS-PAGE 鉴定已达到电泳纯(图 1),
测得其分子量为69.5kD,亚基分子量为34.7kD,是由 相同亚基组成的二聚体。
茶花粉 SOD 性质 成分 作用
2.2 酶的性质研究
2.2.1 酶的类型
茶花粉SOD 经PAGE 电泳后得到的胶条分别用PBK、CHCl3-CH3CH2OH(3:5/V:V)、KCN(5mmol/L)和H2O2 (5mmol/L)浸泡后进行活性染色。发现用CHCl3-CH3CH2OH 处理过的胶条染色后酶活带没有明显变化,说明该
SOD可能是Cu, Zn-SOD 或Fe-SOD,用H2O2 处理过的 胶条活性染色后酶活带消失,说明该SOD不是Mn-SOD,
用KCN处理后其酶活带消失,说明它不是Mn-SOD,也 不是Fe-SOD,因此从茶花粉中提纯的SOD为Cu, Zn-SOD。
2.2.2 酶的等电点 
通过圆盘连续等电聚焦电泳法测得该蛋白的等电点为 pH4.1。
2.2.3 N- 末端氨基酸
用 DNS-Cl 法得到的 DNS- 氨基酸通过聚酰胺夹心薄膜层析法得知该蛋白 N- 末端氨基酸为 Gly(见图 2)。
2.2.4 氨基酸组成分析 
花粉SOD酸水解后经氨基酸分析仪测定结果如表1 所示。
2.2.5 圆二色谱分析结果
茶花粉 SOD 性质 成分 作用
花粉SOD圆二色谱分析(图3)测定[θ]222 为-13516 deg·cm2/dmol。按下列公式可以计算出该蛋白的α螺 旋含量为21.8%。
茶花粉 SOD 性质 成分 作用
α%:蛋白质的α螺旋的百分含量;[θ]222:SOD 在 222nm 处的摩尔椭圆率;62000:多聚 Lys 在 100% α 螺旋时的[θ]222 的值。

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