2.2.9 金属离子对 S O D 活性的影响

SOD 的活性中心比较特殊,其活性直接取决于金属辅基,在磷酸缓冲液中,金属辅基Cu2+ 和Zn2+ 被EDTA 螯合后,酶活性完全丧失。根据这个原理建立了去金 属辅基的酶蛋白的方法。在pH5.0和pH7.0时用EDTA 去离子后,分别加入Cu2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+ 金属 离子后SOD 的活性变化如表3 所示。

金属离子取代衍生物的研究表明,SOD 在去除金属 离子之后,酶活性完全丧失,说明Cu2+、Zn2+ 离子被EDTA 螯合去除。重新加入 C u 2 + 、Z n 2 + 后恢复至天然活性,单 独加入Cu2+ 与加入Cu2+、Zn2+ 结果相同,而单独加入Zn2+ 活性明显不如Cu2+,加入Mg2+、Mn2+ 只能部分恢复活性, 说明Cu2+、Zn2+ 为SOD最适合的辅基。由表3可以看出, 在两种 p H 值条件下,结果接近,说明 p H 对金属替代结 合的影响较小。由此可见二价金属离子Cu2+、Zn2+ 在SOD 的活性和结构稳定中扮演着重要的角色。

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