蜂胶化学含有和生物学的多样性研究胡福良 朱威 李雅晶 郑火青浙江大学动物科学学院 浙江大学医学院 蜂胶是近年来国内外蜂产品研究和开发的一大热点，同时也是制剂理学和化学领域研究的一个热点。蜂胶本身属于制剂品，已收录于《中华人民共和国制剂典》(2005年版，一部)。从制剂学角度看，蜂胶是一味动、植物双性的中制剂。从化学含有角度看，蜂胶含有二十余类、300多种天然含有，具有高度的复杂性和可变性。从生物学活性角度看。蜂胶具有广谱抗菌、抗氧化、抗肿瘤、调节血脂血糖等十分广泛的生物学作用。蜂胶的化学含有取决于蜜蜂采集树脂的地区和植物，不同地区的蜂胶化学含有存在着很大的差别，特别是来自温带地区的蜂胶和热带地区的蜂胶其化学含有相差很大，因此来源不同的蜂胶在化学组成上可能完全不同，这就为蜂胶化学含有的标准化带来了困难。本文对蜂胶化学含有和生物学活性的多样性进行了综述，为蜂胶化学含有的标准化奠定基础。 1 蜂胶化学含有的多样性 蜂胶化学含有研究始于德国。1911年，Kustenmacher首先从蜂胶中鉴定出肉桂醇与肉桂醚。但由于蜂胶含有特别复杂．在相当长的一段时间里尚无适用于蜂胶含有鉴定与分离的技术，蜂胶化学含有研究处于停滞状态。从20世纪50年代以来，随着各种色谱分离技术与质谱新技术的出现，使蜂胶化学含有研究再次活跃并迅速发展。 在20世纪60年代，人们认为蜂胶虽然组成含有非常复杂，但仍像蜂蜡或蜂毒那样有相对固定的化学组成。近年来，对数量众多来自不同产地蜂胶样品的分析表明，蜂胶的化学组成具有高度的复杂性和多样性。蜂胶的植物来源不同导致蜂胶的化学组成不同，尤其是热带地区生产的蜂胶。通过大量的研究，人们得出这样的结论：来源不同的蜂胶在化学组成上可能完全不同。 目前已经证实，温带地区生产的蜂胶，其主要植物来源是白杨属植物，尤其是欧洲黑杨(Populu snigra) 叶芽的分泌物。因而所生产的蜂胶含有典型的“白杨叶芽”多酚类物质：类黄酮苷(黄酮和黄烷酮)、酚酸及其酯。由于白杨属植物只生长在温带，在热带和亚热带无法生长，因此，热带地区生产的蜂胶在化学组成上异于以白杨属植物为来源的温带蜂胶。而在世界上久负盛名的巴西蜂胶的主要植物来源是酒神菊树(Baccharis dracunculifolia)分泌的树脂。其主要化学含有包括双苯丙胺的衍生物：对羟基苯丙烯酸、二萜类、木脂素类及黄酮类。近年来，古巴蜂胶引起了研究人员的关注，其主要化学含有是双苯丙胺苯甲酮，也就是说古巴蜂胶的组成与温带地区蜂胶及巴西蜂胶都不同。 由于不同产地蜂胶的化学组成不同，人们很容易认为不同类型的蜂胶所具有的生物学活性也不同。但在大多数情况下，事实并非如此。表1列举了不同产地蜂胶中的生物活性组分。可以看出，不同产地蜂胶的生物活性组分各有不同：白杨属蜂胶(欧洲蜂胶) 主要含黄烷酮类、黄酮、酚酸及其衍生物；酒神菊属蜂胶(巴西蜂胶) 主要含有异戊烯基对羟基苯丙烯酸、二萜类；古巴红色蜂胶主要含双苯丙胺苯甲酮等。 2 蜂胶生物学活性的功效含有研究 目前，蜂胶的研究热点主要集中在从蜂胶中分离出的特定化学物质及其生物学活性上。应用最多的化学分析技术包括气相色谱—质谱联用分析(GC-MS)和高效液相分析(HPLC)。应用蜂胶中特定的化学物质进行生物活性实验是对蜂胶进行生物活性和制剂理活性研究的最有效的方法。通过这一途径，Chen等从台湾地区蜂胶中分离出2种具有细胞毒性的新的多酚黄酮类物质，这2种物质对实验的3个细胞系均具有细胞毒性并且有潜在的清除自由基作用。Banskota等从挪威蜂胶中分离出对肿瘤细胞增殖有抑制作用的蜂胶活性物质一咖啡酸苯乙酯(CAPE)以及几个结构类似物，包括2个新的苯乙烯酸三甘酯。Nagaoka同样从挪威蜂胶中分离出了上述物质，并且认为它们是挪威蜂胶抑制一氧化氮活性的主要功效含有。Usia从中国蜂胶中分离出一系列具有抗增殖活性的物质，其中的大部分是白杨属蜂胶的组成物质，但也包括2种新的黄酮类化合物：2-甲基丁酰基短叶松素及6-苯丙烯柯因。从希腊蜂胶中，研究者分离出了新的黄烷酮类衍生物 7-间异戊二烯基短叶松素，它与7-异戊二烯基松属素一样，是具有强抗微生物活性的物质。 Banskota 等对巴西蜂胶进行了研究，以探索其中的护肝含有和抵抗幽门螺旋杆菌的组分，结果发现具有这些活性的组分多为多酚类化合物。研究者从巴西蜂胶中还分离出一些抗闭V的化合物：白痴酸的衍生物及一种称为melljkron的新的三掂类化合物。古巴红色蜂胶中的主要化合物双苯丙胺苯甲酮，被证实对多种肿瘤细胞系具有细胞毒性，并且有清除自由基的作用。 3 不同产地、不同化学组成蜂胶生物学活性的比较研究 对不同产地、不同化学组成蜂胶生物学活性的比较研究是当前蜂胶研究中非常吸引人的方向。Kujum Blev等比较了多个不同产地蜂胶样品的抗细菌、抗真菌、抗病毒活性，结果显示，虽然这些蜂胶来源于不同的产地，具有不同的化学组成，但它们无一例外都显示出强有力的抗菌和抗真菌特性。 Popova等对上述研究进行了更进一步的探讨，以寻求不同产地蜂胶与其生物学活性是否具有统计学相关性。他们对欧洲、巴西及中美洲蜂胶的抗菌活性进行了方差分析，结果显示欧洲蜂胶和巴西蜂胶虽然化学组成完全不同，但具有相似的生物学活性。 Banksota等对来自巴西、秘鲁、荷兰和中国的蜂胶样品的细胞毒性、护肝及清除自由基作用进行了比较研究，发现荷兰和中国蜂胶具有最强的细胞毒性作用，而几乎所有的蜂胶样品都显示有护肝作用，各个蜂胶样品的清除自由基作用强度相似。 Salomao等比较了来自巴西和保加利亚蜂胶的抗微生物活性，并且应用CC-MS对其化学组成进行了分析，发现这几个蜂胶样品虽然具有完全不同的化学组成但却对涎传锥虫亚属和一些致病真菌具有同样的抵抗力。 Kumazawa 等比较了阿根廷、奥地利、巴西、保加利亚、智利、中国、匈牙利、新西兰、南非、泰国、乌克兰、乌拉圭、美国和乌兹别克斯坦等地蜂胶的抗氧化活性，并通过 HPLC及质谱分析等方法对这些蜂胶样品的主要化学含有进行了测定。结果发现抗氧化活性强的蜂胶中含有坎菲醇、苯乙烯咖啡酸酯等有抗氧化活性物质。在另一项研究中，他们又利用同样的方法对日本各地的蜂胶进行了比较研究，发现抗氧化活性的强弱与蜂胶中咖啡酸及苯乙烯咖啡酸酯的含量多少有关。 Chen 等也进行了相似的研究，他们对台湾地区不同产地蜂胶的自由基清除作用，对人黑色素瘤细胞的细胞毒性作用及促凋亡作用进行了比较研究，并分别通过HPLC和分光光度法测定了蜂胶中的Propolins(C-异戊二烯基黄烷酮类化合物)和总酚类化合物的含量。结果显示，高含量的Propolins是蜂胶促进人黑色素瘤细胞的凋亡及清除自由基所必需的。 4 对蜂胶研究的总结 蜂胶化学含有的标准化是蜂胶质量标准的基础和前提。通过上述对国内外学者大量研究结果的分析可以看出，蜂胶的化学含有取决于蜜蜂采集树脂的地区和植物，不同地区的蜂胶化学含有存在着很大的差别，特别是来自温带地区的蜂胶和热带地区的蜂胶其化学含有相差很大，这就为蜂胶化学含有的标准化带来了困难。因此，鉴于蜂胶化学含有和生物学活性的复杂性和多样性，要制定一个统一的蜂胶化学标准是不可能的，也是不科学的。蜂胶化学含有标准化的研究任重而道远。