蜂胶的提取方法
付英娟
蜂胶是一种具有多种生物活性的天然产物,素有“紫色黄金”之称。它是一种天然广谱抗菌剂,对病菌真菌、细菌及病毒的活性都有很强的抑制作用。同时能够提高人体免疫能力,此外还具有明显的防腐抗氧化作用,在医学上还具有广谱抗菌、促进机体免疫能力、促进组织再生和局部麻醉等多种生物学功能。
人们在利用蜂胶时绝大多数情况下都使用其提取物。目前,国内外用于食品和药品的蜂胶几乎全部采用乙醇或者水做提取溶剂,有些化妆品采用乙二醇作溶剂,因为它可以提高水乳剂的溶解度,蜂胶的丙酮提取物也被用于洗发剂和洗涤剂中。其它的一些溶剂,如乙醚、醋酸、苯、2%的氢氧化钠以及氨水等,也可以用于蜂胶的提取。但用于人类及动物的药品和食品时,不应选用这些溶剂。选择提取溶剂时,只有在确认是安全的情况下才能采用。
1、 室温浸泡法
溶剂的选择取决于提取物的最终用途和技术的可行性。室温浸泡法包括乙醇提取法、乙二醇提取法、水提取法、油提取、乙酸乙酯等不同溶剂提取法。此类方法简单,所需温度不高,某些易挥发和失活的有效黄酮物质不易失去,但是提取率受时间限制,一般在两周内随着时间的延长而提高,工业上大规模生产一般要浸泡 7d 天以上,有报道说蜂胶在浸泡 30d 后其总黄酮含量还会缓慢增加。
(1) 蜂胶的乙醇的提取法
不同浓度的乙醇提取物其
成分也不同。乙醇提取物的活性成分受其提取
方法如浸泡时间长短,温度高低等因素的影响,乙醇的浓度也会产生一定的影响。
该方法操作过程为:首先将蜂胶去杂取蜡,然后切成小片或碾磨成细粉状,提高溶解程度。若蜂胶太黏难以粉碎,可将其放入冰柜中冷冻数小时后再粉碎。然后将乙醇和蜂胶倒入容器内,稍作搅拌,使乙醇浸没蜂胶,以后每天搅拌 1~2 次,将混合物避光放置 1~2 星期,用干净的细布或滤纸将液体过滤。
(2) 蜂胶的乙二醇提取法
方法与(1)相似,与乙醇相比,乙二醇的缺点是蒸发时需要较高的温度,这对蜂胶提取物中的挥发性物质有破坏作用,不过乙二醇的价格通常比乙醇低,且易于溶于洗发水中,因此受到化妆品生产者的欢迎,虽然乙二醇在外用时没用毒性,但是成人内服的剂量每天不得超过 1.5g。
(3) 蜂胶的水提取法
用水浸泡蜂胶数天或水煮的方法可获得蜂胶的水提取物,其加工、过滤的方法与(1)相同。水提物中活性成分的含量要低于乙醇提取物,但是现在证明它具有抗真菌和细菌的作用。
(4) 蜂胶的油提取法
把 10g 干净的蜂胶加入 200g 橄榄油等,将它们加入锅中,用文火加热约 10min。油温不宜过高,并不断搅拌,过滤后密闭置于暗处存放,最好能冷藏。
(5) 蜂胶的乙酸乙酯等其它有机溶剂
此类方法简单,所需温度不高,某些易挥发失活物质不易失去,但是提取时间长,直接提取率不高。
2、 加热回流提取法
加热回流提取法所需的时间短,且提取率随温度的升高而增加。该法操作简单,且提取效率高。是目前蜂胶提取方法
研究的比较多的一种方法。
(1) 水浴回流乙醇提取法。
顾青等实验采用了将粗蜂胶冷冻粉碎,按 1:4(g/ml)比例加入 95%的乙醇,与 85℃下回流 4h,过滤,滤液回收乙醇得蜂胶浸膏。
(2) 水溶性衍生物提取法。
水溶性的蜂胶提取物在药品和化妆品上的应用很普遍。水溶性衍生物的抗菌特性正在实验之中,目前已发现对许多革兰氏阳性细菌有效。
3、 超临界提取
目前被认为是当前国际上最先进的提取技术,它是一种非热提取技术,特别是在分离纯化方面有着特殊的优势。但是,超临界 CO2是亲脂的,它只能有选择地提取脂类物质,蜂胶中的黄酮类化合物等有效成分在 CO2流体中的溶解度极低,需要加入乙醇作为夹带剂,而且该方法对设备要求较高。
4、 微波提取方法
微波具有穿透力强,选择性高,加热效率强等特点。微波技术的利用,近几年得到很大程度的发展。微波辅助萃取技术就是利用微波对细胞的破壁作用和加热作用,加速细胞内的有效成分快速溶出,在植物有效成分的提取方面得到了广泛的应用。微波技术与传统的方法相比具有设备简单、适用范围广、提取效率高、重现性好、节约时间、节省试剂、污染小等显著特点,达到了强化与优化传热传质的目的。由于提取时间段短,目标组分提取效率比较高,又避免浸出更多无效或者是有毒副作用的组分,有利于进一步进行分离和纯化,并且克服了有效成分易凝聚、焦化等弊病。
5、 超高压提取方法
超高压提取也称超高冷等静压提取,它是在常温下,用 100MPa~1000MPa 的液体静压力作用于提取液上,使提取溶剂成分渗透到药物细胞内,在预定压力下保持一段时间使有效成分达到溶解平衡后迅速卸压,由于细胞内外渗透压力差迅速增大,细胞内的有效成分转移到细胞外的提取液中,于是达到提取有效成分的目的。
与传统的煎煮,回流提取相比,超高压提取在缩短时间、降低能耗,减少杂质成分溶出的同时,提高了有效成分收率。另外,超高压提取是在常温下进行的,因此避免了因热效应而引起的有效成分的变化、损失以及生理活性的降低,同时因为超高压是在密闭的环境下进行的,没有溶剂的挥发,不会对环境造成污染。
6、 超声波提取方法
超声波是一种弹性波,频率在 20KHZ 以上,是一种机械振动在媒质中的传播过程,具有聚束、定向、反射、透射等特性,它在媒质中主要产生两种形式的振动即横波和纵波,前者只能在固体中产生,而后者可在固、液、气体中产生。其震动能产生强大的能量给予媒质点以很大的速度和加速度,加速度随着声波频率的增大而增大。
将超声波应用于提取植物的有效成分,操作简便快捷、无需加热、提出率高、速度快、提取物的结构未被破坏、效果好,显示出明显的优势。