2方法与结果

2.1化学部位的制备:油菜花粉破壁后[8],干燥、粉碎,过80目筛;采用超临界CO2流体进行提取,萃取釜温度50℃,萃取釜压力40MPa;分离釜Ⅰ温度45℃,压力8MPa;分离釜Ⅱ温度35℃,压力4～6MPa;体积流量:30L/h;夹带剂:95%的乙醇;萃取时间1.5h,萃取结束后,合并分离釜Ⅰ与分离Ⅱ的提取物,蒸干得油菜花粉超临界萃取物PN1。

采用极性大孔树脂A-1以上述油菜花粉超临界提取物PN1依次采用5倍柱体积的60%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、丙酮进行洗脱,洗脱液蒸干得PN2～PN54个部位,收率分别为5.24%、1.46%、1.35%、0.92%、1.42%。

2.2油菜花粉不同提取部位对小鼠耳肿胀度的影响:取昆明种普通级小鼠70只,按体质量随机分为7组,每组10只,对照组给予0.4%的聚山梨酯80,给药组给予对应量的油菜花粉不同提取部位样品,阳性药组给予阿司匹林0.2g/kg,ig容积均为20mL/kg,连续给予7d。末次给药后1h,小鼠右耳均匀涂上25μL二甲苯致炎,15min后处死动物。剪下左右两耳,用直径8mm打孔器在同一部位冲下耳片,称质量,计算耳肿胀度(耳肿胀度=右耳片质量-左耳片质量),将其耳肿胀度进行组间比较,t检验[9]。

实验结果表明,PN1、PN2对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用,与对照组比较,差异具有显著性和非常显著性意义(P<0.05,0.01);阿司匹林对二甲苯所致小鼠耳肿胀也有明显的抑制作用,与对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01),结果见表1。

2.3油菜花粉不同提取部位对大鼠足跖肿胀度的影响:取SD大鼠70只,按体质量随机分为7组,每组10只,对照组给予0.4%的聚山梨酯80,给药组给予对应量的油菜花粉不同提取部位样品,阳性药组给予阿司匹林0.12g/kg,ig容积均为10mL/kg,连续给药7d。末次给药前1h用外径千分尺测量大鼠左后足跖的厚度,给药后1h左后足跖注射鸡蛋清0.05mL/爪,然后于注射鸡蛋清后1、2、4、6h用外径千分尺各测量1次左后足跖的厚度,测量时均在相同的部位,计算大鼠左后足跖在给药后不同时间点的肿胀度(肿胀度=注射鸡蛋清后左后足跖厚度-注射鸡蛋清前左后足跖厚度),将其左后足跖肿胀度进行组间比较,t检验。

实验结果表明,在注射鸡蛋清后PN1、PN2对鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀有明显的抑制作用,与对照组比较,差异具有显著性和非常显著意义(P<0.05,0.01);在试验观察期间,阿司匹林对鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用,与对照组比较,差异具有显著性和非常显著性意义(P<0.05,0.01),结果见表2。

2.4油菜花粉不同提取部位对丙酸睾酮诱导大鼠前列腺增生的影响:取SD大鼠,随机取10只作为对照组,其他大鼠在无菌条件下,用2%的戊巴比妥钠麻醉,摘除双侧睾丸,缝合皮肤[11]。手术1周后,将去睾丸大鼠按体质量随机分为8组,每组10只。除对照组外,其余大鼠每日按0.1mL/200g体质量sc丙酸睾酮3mg/kg,共30d,给药组给予对应量的油菜花粉不同提取部位样品,阳性对照组给予前列康3g/kg和舍尼通14.8mg/kg,对照组和模型组给予等体积的蒸馏水,均ig给药,1次/日,连续给药30d。于末次给药后2h处死动物,取前列腺各叶(腹、背+侧叶),用滤纸吸除表面液体,电子天平称其湿质量,计算前列腺各叶指数;取前列腺腹叶固定于10%福尔马林液中作常规石蜡切片,HE染色,做病理组织学检查,观察间质炎症、水肿、充血和纤维组织增生等情况。