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川鄂连蕊茶花粉的形态、生活力及贮藏力研究

中华蜂蜜网 2016年09月30日 10时37分40秒

使用扫描电子显微镜观察了川鄂连蕊茶(Camellia rosthorniana Hand -Mazz )花粉的形态特征,并采用培养基法对其花粉生活力及贮藏力进行了研究。

1.3 花粉生活力测定

于盛花期晴天上午 10 时左右采集刚绽放的花朵,取出花药置于白板纸上,室温放置 24 h 使其自然开裂散出花粉,收集花粉用于生活力及贮藏力试验。
花粉萌发时间的确定:将 5 种液体培养基(表 1)滴于凹槽载玻片上,用解剖针将新鲜花粉均匀撒布在液体培养基表面。然后将载玻片放在铺有湿润滤纸的培养盒内,置于(25 ± 1)℃的恒温箱内,分别暗培养 2、24 和 48 h 后观察统计花粉的萌发率,以确定花粉萌发的最适观察时间。
最佳花粉萌发培养基的确定:共设 5 种液体培养基(表 1),基本成分为 200 mg · L-1 MgSO4 + 100mg · L-1 KNO3 + 300 mg · L-1 Ca(NO3)2,添加不同浓度的 H3BO3 和蔗糖,pH 5.5 ~ 6.0。黑暗条件下培养 48 h 后,于显微镜下观察统计萌发率,并测定花粉管长度,以确定适合川鄂连蕊茶花粉萌发的最佳培养基组成。
统计萌发率时,每处理 3 次重复,每重复随机观测 5 个视野,每个视野花粉不少于 50 粒。以花粉管长度大于花粉粒直径时记为萌发。花粉萌发率(%)= 某视野萌发花粉数/该视野花粉总数 × 100,取平均值作为花粉萌发率。测定花粉管长度时随机观察 3 个视野,每个视野随机选取 20 个萌发的花粉测定花粉管长度,取平均数作为花粉管长度值。

1.4 花粉贮藏力测定

将新鲜花粉于室内阴干 24 h 后收集于指形管,以脱脂棉塞住管口,然后放入干燥器中。将干燥器置于 4 ℃条件下贮藏。贮藏期间,每隔 30 d 取部分花粉于室温条件下进行 5 ~ 6 h 的再吸水,并测定贮藏花粉的生活力。

1.5 数据分析

方差分析(ANOVA)、多重比较(Duncan’s)采用 SAS 8.1 统计软件分析。

2 结果与分析

2.1 花粉形态的观测

扫描电镜结果显示,川鄂连蕊茶花粉形态为扁球形,与连蕊茶组其它植物较为保守的长球形(李广清 等,2005)存在明显差异。花粉粒大小约为 29.13 μm × 40.33 μm,赤道面观为宽椭圆形,极面观接近正三角形(图 1,A、B)。
外壁纹饰为网状纹向穴状纹过渡纹饰,网脊粗大弯曲,粗细均匀,上具刺突,短而钝,分布均匀,网眼小,形状及大小不规则(图 1,C)。与本组其它植物较为相似,尤其与柃叶连蕊茶(C. euryoidesLindl.)相似度较高,差别仅在于本种花粉外壁纹饰上均匀着生短而钝的刺突。

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