建立了强阳离子固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法用于测定蜂蜜中野百合碱、克氏千里光宁、倒千里光碱、千里光菲啉和千里光宁等5种双稠吡咯啶类生物碱。
表1 5种双稠吡咯啶类生物碱的质谱检测参数
Table 1 MS/Ms parameters for the five PAs
2、结果与讨论
2.1色谱和质谱条件的优化
分析比较了乙腈-水、乙腈-5mmol/L乙酸铵溶液、乙腈-0.1%甲酸-5mmol/L乙酸铵溶液作为流动相时5种PAs的保留和峰形。结果表明,流动相中加入适量乙酸铵有助于5种PAs化合物的色谱保留,但峰形会略微拖尾。而随着少量甲酸的加入,5种PAs的保留时间均有所提前且峰形更对称。同时,正离子模式下加入少量的酸有利于目标化合物的离子化,使灵敏度提高10%~20%。分析中对常规碳十八分析色谱柱VarianPola-ris(填料粒径5μm)和超高效碳十八分析色谱柱Phenomenex Kinetex(填料粒径2.6μm)进行了比对,发现超高效分析色谱柱由于柱效高,可以有效消除某些特种蜂蜜(如洋槐)中的干扰,由于分析物只有5种(10个离子通道),在不分段扫描的情况下每个峰的扫描点数可以达到15个,满足定量需要。因此选用超高效碳十八分析色谱柱Phenomene x Ki-netex,典型的蜂蜜基质加标色谱图见图1。