MGO 的紫外吸收弱，需衍生化反应后再进行检测。MGO 属于 1，2-二羰基化合物，Weigel 等［12］报道 1，2-二羰基化合物能与邻苯二胺反应生成喹啉类化合物( 见图 1) ，在反相色谱柱上有较好的保留，且紫外吸收强。Mavric 等［4］ 和 Oelschlaegel等［13］建立的 MGO 检测方法中的衍生化条件均是在Weigel等［12］报道的基础上进行了修改，均为蜂蜜水溶液与邻苯二胺水溶液在室温、避光条件下反应 8 h以上，只是蜂蜜样品和邻苯二胺溶液的浓度不同。本实验在室温、避光、反应时间( 8 h 以上) 等衍生化条件不变的基础上，对衍生化试剂的浓度进行了优化。

将 100 mg /L 的 MGO 标准溶液分别与 1、2、4、6、8、10 g /L 的邻苯二胺水溶液按体积比 1∶ 1 混合，进行衍生化反应。通过比较 MGO 衍生化产物的峰面积考察衍生化效率，结果如图 2 所示。

从图 2 中可以看出，邻苯二胺水溶液的浓度从1 g /L 升高到 6 g /L，衍生化产物的量逐渐上升; 从 6g /L 升高到 10 g /L，衍生化产物的量开始趋于稳定，提示反应到达完全。因此，本实验选择 6 g /L 的邻苯二胺水溶液。

此外，由于蜂蜜直接稀释后的水溶液含糖量高，对色谱柱伤害较大，本实验对衍生化反应中蜂蜜水溶液的浓度也进行了调整。Mavric 等［4］ 和 Weigel等［12］报道的方法中蜂蜜水溶液的浓度分别为 150和 300 g /L，本实验中蜂蜜水溶液的浓度为 100 g /L。并且与邻苯二胺溶液等体积混合，因此用于进样的溶液中只含有 50 g /L 的蜂蜜，能尽量避免高糖基质对色谱柱的损伤。在本实验的方法学验证和实际样品检测完成前后，色谱柱压力和 MGO 衍生化产物的保留时间均未见明显改变。